Përgatitja e mostrës dhePo ngarkohet
Për shkak të përdorimit të një sistemi tampon të vazhdueshëm pa grumbullim xhel në shumicën e rasteve, mostrat duhet të kenë një përqendrim të përshtatshëm dhe një vëllim të vogël. Përdorni apipetëpër të shtuar ngadalë kampionin, me 5-10 μg për pus, për të shmangur një rënie të ndjeshme të rezolucionit. Kurngarkimi i mostrës, furnizimi me energji elektrike duhet të fiket. Mostra duhet të përmbajë një ngjyrë treguese (0,025% bromofenol blu ose portokalli) dhe saharozë (10-15%) ose glicerinë (5-10%) për të rritur densitetin e saj, për të koncentruar kampionin dhe për të parandaluar përhapjen. Megjithatë, ndonjëherë saharoza ose glicerina mund të shkaktojnë shirita në formë U në rezultatet e elektroforezës, të cilat mund të shmangen duke përdorur 2.5% Ficoll (polivinilpirrolidon).
Elektroforeza
Tensioni për elektroforezë është 5-15 V/cm, përgjithësisht rreth 10 V/cm. Për ndarjen e molekulave të mëdha, voltazhi duhet të jetë më i ulët, zakonisht jo më shumë se 5 V/cm.
Ngjyrosje
Bojë fluoreshente etidium bromidi (EB) përdoret zakonisht për ngjyrosje për të vëzhguar brezat e ADN-së në xhel agarozë. EB mund të fusë ndërmjet çifteve bazë të molekulave të ADN-së, duke bërë që EB të lidhet me ADN-në. Thithja e dritës ultravjollcë 260 nm nga ADN-ja transferohet në EB dhe EB e lidhur lëshon fluoreshencë në 590 nm në rajonin e kuq-portokalli të spektrit të dritës së dukshme. Ngjyrosja e xhelit në një tretësirë 1 mmol/L MgSO4 për 1 orë mund të zvogëlojë fluoreshencën e sfondit të shkaktuar nga EB e palidhur, duke lehtësuar zbulimin e sasive të vogla të ADN-së.
Ngjyra EB ka disa përparësi: është e lehtë për t'u përdorur, nuk thyen acidet nukleike, ka ndjeshmëri të lartë dhe mund të njollosë si ADN-në ashtu edhe ARN-në. EB mund t'i shtohet kampionit dhe të gjurmohet duke përdorur thithjen UV në çdo kohë. Pas ngjyrosjes, EB mund të hiqet me ekstraktim me n-butanol.
Megjithatë, boja EB është një mutagjen i fuqishëm dhe duhet të merren masa paraprake, të tilla si veshja e dorezave polietileni, gjatë trajtimit. Portokalli Acridine është gjithashtu një bojë e përdorur zakonisht sepse mund të dallojë midis acideve nukleike me një fije dhe me dy fije (ADN, ARN). Ai shfaq fluoreshencë të gjelbër (530 nm) për acidet nukleike me dy fije dhe fluoreshencë të kuqe (640 nm) për acidet nukleike me një zinxhir. Për më tepër, ngjyra të tjera si blu metilen, jeshile metilen dhe kinolina B mund të përdoren për ngjyrosje.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Bioteknology) është specializuar në prodhimin e instrumenteve të elektroforezës për më shumë se 50 vjet me ekipin tonë profesional teknik dhe qendrën e R&D. Ne kemi linjë prodhimi të besueshme dhe të plotë nga projektimi në inspektim, dhe magazinë, si dhe mbështetje për marketing. Produktet tona kryesore janë qeliza e elektroforezës (rezervuar/dhomë), furnizimi me energji elektrike me elektroforezë, transilluminator blu LED, transilluminator UV, sistemi i imazhit dhe analizës së xhelit etj.
Tani po kërkojmë partnerë, si rezervuari i elektroforezës OEM ashtu edhe shpërndarësit janë të mirëpritur.
Nëse keni ndonjë plan blerjeje për produktet tona, ju lutemi mos hezitoni të na kontaktoni. Mund të na dërgoni mesazh në email[email i mbrojtur]ose[email i mbrojtur], ose ju lutemi na telefononi në +86 15810650221 ose shtoni Whatsapp +86 15810650221, ose Wechat: 15810650221.
Ju lutemi skanoni kodin QR për ta shtuar në Whatsapp ose WeChat.
Koha e postimit: Dhjetor-20-2023