Parimi
Elektroforeza e filmit të acetatit të celulozës është një metodë elektroforeze duke përdorur një film acetat celuloze si mbështetje. Dukuria në të cilën grimcat e ngarkuara lëvizin drejt elektrodës së kundërt nën veprimin e fushës elektrike quhet elektroforezë. Meqenëse çdo proteinë ka një pikë izoelektrike specifike, nëse një proteinë vendoset në një tretësirë me pH më të ulët se pika e saj izoelektrike, proteina do të ngarkohet pozitivisht dhe do të lëvizë drejt elektrodës negative. Përkundrazi, kalon në polin pozitiv. Për shkak se shpejtësia e molekulave të proteinave që lëvizin në një fushë elektrike lidhet me ngarkesën e tyre, formën dhe madhësinë e molekulave, proteina të ndryshme mund të ndahen me elektroforezë. Serumi përmban një sërë proteinash, të cilat të gjitha kanë pika izoelektrike në pH 7.5 ose më pak. Kur serumi vendoset në tampon pH 8.6 për të kryer elektroforezën, të gjitha proteinat e serumit ngarkohen negativisht dhe do të lëvizin drejt anës pozitive në fushën elektrike. Meqenëse proteinat e ndryshme të serumit kanë ngarkesa të ndryshme në të njëjtin pH, grimcat molekulare janë të ndryshme në madhësi, dhe kështu shpejtësia e migrimit është e ndryshme dhe ato ndahen me elektroforezë. Pikat izoelektrike dhe pesha molekulare e proteinave të serumit tregohen në tabelën e mëposhtme:
| Proteina | Pikat izoelektrike (PI) | Pesha molekulare |
| Albumi | 4.88 | 69 000 |
| α1-gloulin | 5.00 | 200 000 |
| α2-gloulin | 5.06 | 300 000 |
| β-gloulin | 5.12 | 9 000-150 000 |
| γ-gloulin | 6,85~7,50 | 156 000 ~ 300 000 |
Eksperimenti është për të ndarë proteina të ndryshme në serumin e gjakut me membranën e acetatit të celulozës (shkurt. CAM) si media mbështetëse. CAM është një lloj loos me shkumëefilm me uniformë të mirë, dhe trashësia është 0.1mm-1.5mm, e cila ka një thithje të caktuar uji.
Materialet, instrumentet dhe reagentët për Elektroforezën CAM
Mostrat:serum të shëndetshëm të gjakut të njeriut
Instrumenti:furnizimi me energji elektrike DYY-6C, rezervuari elektroforezë DYCP-38C, ngarkimi i mostrës superiore WD-9404
Reagentët
1) membrana acetate celuloze 7X9cm
2) PH 8.6 tretësirë tampon barbitol (forca jonike 0.05-0.09, është koha 0.06 e ditës.): merrni 1,84 g acid Dietil barbiturik dhe më pas merrni 1.03 g Dietil natriumi pentobarbital, shtoni pak ujë të distiluar për t'u tretur, dhe bëni deri në 1000 ml;
3) Njollë: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, shtoni 100ml ujë të distiluar;
4) TBS/T ose PBS/T: 45ml etanol 95%, 5ml acid acetik glacial, shtoni 50ml ujë të distiluar;
5) Tretësirë pastrues: 70 ml etanol pa ujë, 30 ml acid acetik glacial.
Eksperimentoni Metod
1) Përgatitni membranën: Zhyteni membranën në tretësirën buferike të barbitolit për 30 min-8 orë dhe nxirreni atë, hiqni tretësirën shtesë me letër absorbuese.
2) Ngarkimi i mostrave: Dalloni anën e përafërt dhe anën e lëmuar të membranës dhe shënoni një vijë në distancë 1,5 cm deri në skajin e sipërm në anën e përafërt. Ngarkoni mostrat me mjet superior për ngarkimin e kampionit në anën e ashpër. Shënim: Mostrat duhet të ngarkohen në anën e ashpër të membranës. Pasi mostrat e serumit të jenë depërtuar plotësisht në membranë, kthejeni membranën, vendosni anën e ashpër (me kampione) me fytyrë poshtë në rezervuar dhe fundi me mostra vendoset në elektrodë negative.
3) Elektroforeza: Ndizni furnizimin me energji elektrike, 0.4～Membrana 0.6m A/cm, koha e funksionimit është 30-45 min. Pas kryerjes së elektroforezës, fikeni energjinë.
4) Njollojeni dhe pastroni: Nxirreni membranën nga rezervuari dhe zhytniit në tretësirën e ngjyrosjes për 5 minuta dhe më pas pastroni në tretësirën pastrues pa pushim për 3-4 herë derisa ngjyra e sfondit të jetë e qartë. Proteinat e serumit duhet të shfaqen në shirita, dhe normalisht ka pesë zona, nga fundi i sipërm i vijës së shënuar, Albumin, α1-gloulin, α2-gloulin, β-gloulin, γ-gloulin.
5) Ruajtja: vendosni elektroforezën e thatëbandënë tretësirë pastrues për 10-15 minuta dhe më pas e nxirrni dhe e ngjisni në një gotë të pastër, pasi të thahet do të bëhet një film transparent.bandë.
EksperimentoniRezultati
Efekti i ndarjes së mostrave të serumit është i mirë dhe nuk ka fenomen të bishtit të brezit. Përsëritshmëria e rezultateve ndryshon për shkak të procedurave të testimit dhe metodave të eksperimentuesit, dhe përsëritshmëria është e lartë.
konkluzioni
Sistemi i shpejtë i zbulimit të elektroforezës klinike (Rezervuari i elektroforezësDYCP-38C,furnizimi me energji elektrikeDYY-6C dhe ngarkimi i mostrës superiore WD-9404) prodhuar nga kompania jonëkompania Beijing Liuyi Biotechnology Co., Ltdplotëson kërkesat eksperimentale,dheRezultatet janë të riprodhueshme, të thjeshta dhe të shpejta, të përshtatshme përmësimdhënieskërkimore.
Pekin LiuyiBiotechnology Co., Ltd është e specializuar në prodhimin e produkteve të elektroforezës për industrinë e shkencës së jetës, e cilaka histori më shumë se 50-vjeçare në Kinë dhe kompania mund të ofrojë produkte të qëndrueshme dhe me cilësi të lartë në të gjithë botën. Përgjatë viteve të zhvillimit, ajo është e denjë për zgjedhjen tuaj!
Tani po kërkojmë partnerë, si rezervuari i elektroforezës OEM ashtu edhe shpërndarësit janë të mirëpritur.
Për më shumë informacion rreth nesh, ju lutemi na kontaktoni me email[email i mbrojtur]ose[email i mbrojtur].
Koha e postimit: Nëntor-14-2022