Hyrje
Elektroforeza me xhel është një teknikë themelore në biologjinë molekulare, e përdorur gjerësisht për ndarjen e proteinave, acideve nukleike dhe makromolekulave të tjera. Kontrolli i duhur i vëllimit të mostrës, tensionit dhe kohës së elektroforezës është vendimtar për arritjen e rezultateve të sakta dhe të riprodhueshme.Kolegja jonë e laboratorit ofronpraktikat më të mira për menaxhimin e këtyre parametrave gjatë elektroforezës me xhel SDS-PAGE.
Produktet e elektroforezës së xhelit të Bioteknologjisë Pekin Liuyi
Vëllimi i mostrës: Sigurimi i konsistencës
Kur kryeni elektroforezë SDS-PAGE, vëllimi i mostrës është një faktor kyç që mund të ndikojë ndjeshëm në zgjidhjen e rezultateve tuaja. Në përgjithësi rekomandohet të ngarkoni 10 µL proteina totale për pus. Për të siguruar qëndrueshmëri dhe për të parandaluar përhapjen e mostrës midis puseve ngjitur, është e rëndësishme të ngarkoni një vëllim të barabartë të tamponit ngarkues 1x në çdo pusetë bosh. Kjo masë paraprake ndihmon në parandalimin e përhapjes së mostrave në korsitë fqinje, gjë që mund të ndodhë nëse pusi lihet bosh.
Përpara se të ngarkoni mostrat tuaja, filloni gjithmonë duke shtuar një shënues të peshës molekulare në një pus. Kjo lejon identifikimin e lehtë të madhësive të proteinave pas elektroforezës.
Kontrolli i tensionit: balancimi i shpejtësisë dhe rezolucionit
Tensioni i aplikuar gjatë elektroforezës ndikon drejtpërdrejt si në shpejtësinë me të cilën mostrat migrojnë përmes xhelit ashtu edhe në rezolucionin e ndarjes. Për SDS-PAGE, këshillohet të filloni me një tension të ulët rreth 80 V. Ky tension fillestar i ulët lejon që mostrat të migrojnë ngadalë dhe në mënyrë të barabartë, duke i përqendruar ato në një brez të mprehtë ndërsa hyjnë në xhelin ndarës.
Pasi mostrat të kenë hyrë plotësisht në xhelin ndarës, voltazhi mund të rritet në 120 V. Ky tension më i lartë përshpejton migrimin, duke siguruar që proteinat të ndahen në mënyrë efikase sipas peshës së tyre molekulare. Është thelbësore të monitorohet progresi i pjesës së përparme të ngjyrës blu të bromfenolit, që tregon përfundimin e elektroforezës. Për xhel me përqendrim 10-12%, zakonisht mjaftojnë 80-90 minuta; megjithatë, për xhel 15%, mund t'ju duhet të zgjasni pak kohën e funksionimit.
Menaxhimi i kohës: Të dish se kur të ndalosh
Koha është një tjetër faktor kritik në elektroforezën e xhelit. Përdorimi i xhelit për një periudhë shumë të gjatë ose shumë të shkurtër mund të çojë në ndarje jo optimale. Migrimi i ngjyrës blu të bromofenolit është një tregues i dobishëm: kur ajo arrin në fund të xhelit, zakonisht është koha për të ndaluar vrapimin. Për xhel standard, të tillë si 10-12%, një kohëzgjatje e elektroforezës prej rreth 80-90 minuta është zakonisht adekuate. Për xhel me përqindje më të lartë, si 15%, koha e funksionimit duhet të zgjatet për të siguruar ndarje të plotë të proteinave.
Menaxhimi i tamponëve: Ripërdorimi dhe përgatitja e tamponëve
Buferi i elektroforezës mund të ripërdoret 1-2 herë, në varësi të kushteve specifike të laboratorit tuaj. Megjithatë, për rezultate optimale, rekomandohet përgatitja e tamponit të freskët 10x dhe hollimi i tij pak para përdorimit. Kjo siguron që tamponi të ruajë efektivitetin e tij, duke çuar në rezultate më të besueshme të elektroforezës.
Produktet e elektroforezës së xhelit të Bioteknologjisë Pekin Liuyi
Duke kontrolluar me kujdes volumin e mostrës, tensionin dhe kohën e elektroforezës, ju mund të përmirësoni ndjeshëm saktësinë dhe riprodhueshmërinë e rezultateve të elektroforezës suaj të xhelit. Zbatimi i këtyre praktikave më të mira në punën tuaj laboratorike do t'ju ndihmojë të arrini breza më të qartë dhe më të dallueshëm, duke çuar në të dhëna më të mira për analiza në rrjedhën e poshtme.
Nëse keni më shumë metoda të mira për të optimizuar eksperimentin e elektroforezës me xhel, mirëpresim të diskutoni me ne!
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Bioteknology) është specializuar në prodhimin e instrumenteve të elektroforezës për më shumë se 50 vjet me ekipin tonë profesional teknik dhe qendrën e R&D. Ne kemi linjë prodhimi të besueshme dhe të plotë nga projektimi në inspektim, dhe magazinë, si dhe mbështetje për marketing. Produktet tona kryesore janë qeliza e elektroforezës (tank/dhoma), furnizimi me energji elektrike me elektroforezë, transilluminatori blu LED, transilluminatori UV, sistemi xhel imazhi dhe analizimi etj. Ne gjithashtu furnizojmë instrumentet laboratorike si instrument PCR, mikser vorbull dhe centrifugë për laborator.
Nëse keni ndonjë plan blerjeje për produktet tona, ju lutemi mos hezitoni të na kontaktoni. Mund të na dërgoni mesazh në email[email i mbrojtur]ose[email i mbrojtur], ose ju lutemi na telefononi në +86 15810650221 ose shtoni Whatsapp +86 15810650221, ose Wechat: 15810650221.
Ju lutemi skanoni kodin QR për ta shtuar në Whatsapp ose WeChat.
Koha e postimit: Gusht-20-2024